Perbedaan yang menonjol antara ELISA dan Dot ELISA adalah ELISA membantu dalam deteksi dan kuantifikasi antibodi , hormon, peptida atau protein lain dalam sampel biologis sedangkan, dalam Dot-ELISA, substrat kromogenik hanya mengendap di area aktivitas enzim . Selanjutnya, tiga jenis utama ELISA adalah ELISA langsung, ELISA tidak langsung, dan ELISA imunometrik atau sandwich sedangkan ELISA dot adalah jenis imunoassay enzim fase padat, sama seperti ELISA umum.
ELISA dan dot-ELISA adalah dua jenis alat imunologi yang digunakan untuk mendeteksi dan mengukur jumlah protein terutama antigen. Mereka lebih cepat, fleksibel, dapat direproduksi, sangat sensitif, dan pengujian throughput tinggi.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa itu ELISA – Pengertian, Jenis, Kepentingannya 2. Apa itu Dot ELISA – Pengertian, Metode, Kepentingan 3. Apa Persamaan Antara ELISA dan Dot ELISA – Garis Besar Karakteristik Umum 4. Apa Perbedaan Antara ELISA dan Dot ELISA – Perbandingan Perbedaan Kunci
Istilah Utama
ELISA Langsung, ELISA Dot, ELISA, Tes Imunologis, ELISA Tidak Langsung, ELISA Sandwich
Yang perlu anda ketahui tentang ELISA?
ELISA ( enzim-linked immunosorbent assay ) adalah jenis immunoassay enzim fase padat yang bertanggung jawab untuk mendeteksi protein spesifik dalam sampel biologis dengan bantuan antibodi primer. Dalam tes ini, reaksi enzimatik membantu mendeteksi antibodi primer yang terikat. Di sini, enzim menggunakan substrat kromogenik untuk mengembangkan warna. Selain itu, fase padat yang digunakan oleh ELISA terutama adalah pelat mikrotiter.
Gambar 1: Pelat Mikrotiter
Selanjutnya, ada tiga jenis utama ELISA berdasarkan metodologinya.
ELISA langsung
Dalam ELISA langsung, melapisi permukaan pelat dengan sampel memungkinkan antibodi terkait-enzim untuk berikatan dengan protein spesifik pada pelat. Kemudian, menambahkan substrat kromogenik membantu dalam mendeteksi antibodi yang terikat protein.
Gambar 2: ELISA langsung
ELISA tidak langsung
ELISA tidak langsung melibatkan deteksi protein spesifik dalam sampel dengan proses pengikatan dua langkah. Di sini, langkah pertama adalah melapisi pelat dengan sampel dan menginkubasinya dengan jenis antibodi primer tertentu. Kemudian, langkah selanjutnya adalah menginkubasi pelat ini dengan antibodi sekunder, yang mengikat antibodi primer. Selanjutnya, antibodi sekunder ini memiliki hubungan dengan enzim. Maka dari itu, menambahkan substrat kromogenik membantu dalam mendeteksi protein spesifik pada piring menggunakan pengembangan warna.
ELISA Imunometrik/Sandwich
Dalam sandwich ELISA, langkah pertama adalah mengapit protein spesifik yang akan dideteksi dari sampel di antara antibodi primer dan sekunder. Di sini, proses pertama adalah melapisi pelat dengan antibodi primer, tetapi tidak dengan sampel. Kemudian, proses selanjutnya adalah menginkubasi sampel dengan plat ini. Setelah itu, protein spesifik yang terikat pada antibodi primer dapat dideteksi dengan bantuan antibodi sekunder.
Yang perlu anda ketahui tentang Dot ELISA?
Dot-ELISA adalah jenis immunoassays enzim fase padat. Karakteristik yang paling signifikan dari dot-ELISA adalah pengendapan substrat kromogenik hanya ke daerah dengan aktivitas enzimatik. Di sini, fase padat adalah membran nitroselulosa, yang memungkinkan pengikatan protein ke permukaan. Setelah menginkubasi sampel dengan membran nitroselulosa, sampel berlebih dicuci, dan permukaan membran nitroselulosa yang tidak terikat diblokir.
Gambar 3: Titik ELISA
Kemudian, antibodi primer ditambahkan ke membran nitroselulosa. Akhirnya, penambahan antibodi sekunder yang terkait dengan enzim membantu dalam mendeteksi antibodi sekunder yang terikat protein. Dengan demikian, ini memungkinkan kompleks protein-antibodi muncul sebagai titik yang jelas pada membran nitroselulosa.
Apa Persamaan Antara ELISA dan Dot ELISA
- ELISA dan dot ELISA adalah dua jenis tes imunologi yang digunakan untuk mendeteksi dan mengukur protein dalam sampel biologis.
- Mereka adalah immunoassays enzim fase padat (EIA).
- Juga, kedua metode menggunakan enzim seperti alkaline phosphatase (AP) dan horseradish peroxidase (HRP) yang terkait dengan antibodi sekunder. Dengan penambahan substrat kromogenik yang sesuai, yang mengembangkan warna melalui aksi enzimatik, protein spesifik dalam sampel dapat dideteksi.
- Selain itu, kedua metode ini memiliki sensitivitas tinggi dan throughput tinggi. Juga, mereka lebih cepat dan dapat direproduksi juga.
Apa Perbedaan Antara ELISA dan Dot ELISA
Definisi
ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) adalah istilah untuk tes imunokimia cepat yang melibatkan enzim yang digunakan untuk mengukur berbagai macam tes cairan tubuh sementara dot ELISA adalah istilah untuk immunoassay fase padat yang dapat digunakan untuk mendeteksi antigen atau antibodi. Jadi, inilah Perbedaan yang menonjol antara ELISA dan ELISA titik.
Jenis
Ketiga jenis ELISA tersebut adalah ELISA langsung, ELISA tidak langsung, dan ELISA sandwich sedangkan ELISA dot adalah jenis ELISA sandwich.
metode
ELISA melibatkan mendeteksi protein spesifik dengan bantuan antibodi dan mendeteksi antibodi terikat melalui reaksi enzimatik sementara di dot ELISA, substrat kromogenik hanya mengikat area dengan aktivitas enzimatik. Maka dari itu, ini adalah perbedaan lain antara ELISA dan dot ELISA.
Fase padat
Satu lagi perbedaan antara ELISA dan dot ELISA adalah ELISA terutama menggunakan pelat mikrotiter sebagai fase padat sedangkan dot-ELISA menggunakan membran nitroselulosa sebagai fase padat.
Kata terakhir
ELISA adalah jenis uji imunologis yang melibatkan deteksi protein spesifik dalam sampel biologis dengan bantuan antibodi. Di sini, perkembangan warna melalui reaksi enzimatik terlibat dalam pendeteksian antibodi yang terikat pada protein. Selain itu, dot ELISA adalah jenis sandwich ELISA. Di sini, substrat kromogenik mengendap di area dengan aktivitas enzimatik. Maka dari itu, Perbedaan yang menonjol antara ELISA dan dot ELISA adalah metode pendeteksiannya.
Sumber bacaan:
- “TechNote: Apa Perbedaan antara Jenis Pengujian ELISA?” Enzo Life Sciences, 27 Juli 2018, Tersedia Di Sini 2. Z, Svobodova. “Tes Afinitas Dot-ELISA: Metode Biaya Rendah yang Mudah untuk Memperkirakan Aktivitas Pengikatan Antibodi Monoklonal.” Jurnal Teknik Analytical & Bioanalytical, vol. 04, tidak. 03, 2013, doi: 10.4172/2155-9872.1000168.
Sumber gambar:
- “Pelat mikrotiter” Oleh Jeffrey M. Vinocur – Karya sendiri ( CC BY 2.5 ) melalui Commons Wikimedia 2. “Diagram ELISA” Oleh Cavitri – Karya sendiri ( CC BY 3.0 ) melalui Commons Wikimedia 3. “Dot-Elisa” Oleh MrPotatoDeluxe – Karya sendiri ( CC BY-SA 3.0 ) melalui Commons Wikimedia
