Perbedaan yang menonjol antara flow cytometry dan FACS adalah flow cytometry memungkinkan pengumpulan data yang cepat, akurat, dan sederhana yang terkait dengan banyak parameter dari campuran cairan heterogen yang mengandung sel hidup. Tapi, FACS ( penyortiran sel yang diaktifkan fluoresensi ) adalah turunan dari flow cytometry yang memungkinkan untuk secara fisik menyortir campuran sel yang heterogen ke dalam populasi yang berbeda. Selanjutnya, flow cytometry menggunakan sifat hamburan cahaya diferensial sel untuk mengumpulkan data, sementara FACS menggunakan antibodi yang sangat spesifik yang ditandai dengan pewarna fluoresen untuk membedakan antara tipe sel. Selain itu, flow cytometry menggunakan sensor untuk memperoleh data, tetapi FACS menggunakan elektromagnet untuk menyortir sampel.
Singkatnya, flow cytometry dan FACS adalah dua teknik dalam biologi sel analitik yang digunakan untuk membuat profil sel dalam campuran heterogen. Umumnya, flow cytometry melibatkan analisis sel dan mengukur ekspresi protein sebagai teknik analisis lebih lanjut dari FACS, yang melibatkan pemilahan sel dalam populasi campuran.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa itu Flow Cytometry – Definisi, Proses, Pentingnya 2. Apa itu FACS – Definisi, Proses, Pentingnya 3. Apa Persamaan Antara Flow Cytometry dan FACS – Garis Besar Karakteristik Umum 4. Apa Perbedaan Antara Flow Cytometry dan FACS – Perbandingan Perbedaan Kunci
Istilah Utama
Fluoresensi Aktif, FACS, Aliran Sitometri, Campuran Sel Heterogen, Hamburan Cahaya
Yang perlu anda ketahui tentang Flow Sitometri
Flow cytometry adalah teknik biologi sel analitik, yang memungkinkan untuk menentukan parameter berbeda dari sel hidup dalam campuran heterogen. Juga, perangkat flow cytometry berbasis impedansi pertama ditemukan oleh Wallace H. Coulter pada tahun 1953. Biasanya, parameter yang berbeda diukur dengan flow cytometry meliputi;
- Penghitungan sel
- Menentukan sifat dan fungsi sel
- Mendeteksi mikroorganisme
- Deteksi biomarker
- Deteksi rekayasa protein
- Diagnosis gangguan kesehatan seperti kanker darah
Proses
Selanjutnya suspensi sampel dengan beberapa jenis sel dalam fluida memungkinkan mengalir melalui flow cytometer. Di dalamnya, sel-sel idealnya mengalir satu sel pada satu waktu melalui sinar laser. Di sini, tipe sel menunjukkan karakteristik hamburan cahaya diferensial yang unik untuk tipe sel. Biasanya, ini mungkin karena ekspresi diferensial protein, kandungan asam nukleat, komponen intraseluler atau komponen permukaan sel.
Gambar 1: Aliran Sitometri
Analisis
Selain itu, dalam flow cytometry, berbagai jenis pola hamburan cahaya dan pola pancaran fluoresensi terlibat dalam analisis jenis sel. Mereka termasuk cahaya hamburan ke depan dan hamburan samping, emisi fluoresensi, dan analisis multiparametrik. Dari jumlah tersebut, cahaya yang dihamburkan ke depan dibiaskan dari sel, berlanjut di sepanjang jalur yang sama yang dilaluinya. Juga, ini membantu untuk mendeteksi ukuran sel. Sementara itu, cahaya hamburan samping dibiaskan dari sel ke arah yang berada di luar jalur cahaya asli. Dengan demikian, ini menentukan granularitas dan kompleksitas berbagai jenis sel.
Selanjutnya, setelah eksitasi oleh panjang gelombang laser yang kompatibel, molekul sel fluoresen memancarkan cahaya fluoresen, membantu identifikasi berbagai struktur sel. Selain itu, pewarna fluoresen atau antibodi bertanda fluoresensi juga dapat digunakan untuk memberi label pada struktur sel tertentu. Selain itu, cahaya yang tersebar ke depan vs samping diplot dari populasi leukosit, membantu identifikasi spesifik granulosit dan limfosit.
Yang perlu anda ketahui tentang FACS?
FACS (penyortiran sel yang diaktifkan fluoresensi) adalah jenis sitometri aliran yang dimodifikasi. Karakteristik karakteristik utama FACS adalah kemampuannya untuk secara fisik memisahkan setiap jenis sel dalam campuran heterogen. Untuk ini, teknik ini menggunakan antibodi spesifik target berlabel fluoresen untuk mengidentifikasi jenis sel tertentu dalam campuran. Maka dari itu, FACS memisahkan campuran sel heterogen menjadi dua jenis sel lagi. Selain itu, FACS pertama kali ditemukan oleh Len Herzenberg, yang kemudian memenangkan Hadiah Kyoto pada tahun 2006 untuk karya maninya.
Gambar 2: FACS
Pentingnya
Selain itu, salah satu pentingnya penyortiran sel adalah untuk memisahkan sel berdasarkan fenotipe. Maka dari itu, ini memungkinkan analisis kandungan asam nukleat, ekspresi protein, dan kandungan metabolik khusus untuk fenotipe itu. Kedua, ini membantu untuk menghasilkan koloni sel sehat dan terdefinisi secara fenotipik untuk generasi sel induk atau garis sel CRISPR.
Proses
Biasanya, di FACS, sampel mengalir melalui nosel bergetar, yang mengganggu aliran menjadi tetesan, idealnya berisi satu sel. Kemudian, tetesan ini mengalir melalui cincin pengisian listrik, yang secara fisik menyortir jenis sel berdasarkan muatannya.
Persamaan Antara Flow Cytometry dan FACS
- Flow cytometry dan FACS adalah dua teknik dalam biologi sel analitik.
- Secara umum, mereka menggunakan fluoresensi dan sifat lainnya untuk mendeteksi jenis sel yang berbeda dalam campuran heterogen.
- Untuk ini, mereka menggunakan perbedaan dalam komponen permukaan sel atau komponen intraseluler dari berbagai jenis sel.
- Juga, kedua metode mengumpulkan data hamburan maju, hamburan samping, dan fluoresen.
- Selain itu, kedua teknik tersebut memiliki aplikasi dalam biologi molekuler, genetika, imunologi, patologi, dan kedokteran.
Perbedaan Antara Flow Cytometry dan FACS
Definisi
Flow cytometry adalah istilah untuk analisis bahan biologis melalui deteksi sifat penyerap cahaya atau fluoresensi sel atau fraksi subseluler seperti kromosom saat mereka melewati aliran sempit melalui sinar laser. Sementara itu, FACS (penyortiran sel yang diaktifkan fluoresensi) adalah istilah untuk jenis sitometri aliran khusus, yang menyediakan metode untuk menyortir campuran heterogen sel biologis menjadi dua atau lebih wadah, satu sel pada satu waktu, berdasarkan hamburan cahaya spesifik dan fluoresen. karakteristik masing-masing sel.
Korespondensi
Flow cytometry adalah teknik biologi sel analitik, sedangkan FACS adalah jenis khusus dari flow cytometry.
Konsekuensi
Flow cytometry mengikuti FACS, sedangkan FACS adalah langkah pertama dari analisis campuran sel heterogen.
Makna
Flow cytometry melibatkan analisis sel dan mengukur ekspresi protein sebagai teknik analisis lebih lanjut dari FACS, sementara FACS melibatkan pemilahan sel dalam populasi campuran.
Fungsi
Flow cytometry mengukur sifat-sifat sel seperti jumlah, ukuran, dan kandungan asam nukleat sel, sementara FACS memisahkan sel menjadi subpopulasi dari campuran heterogen.
Metode Pengambilan Sampel
Flow cytometry menggunakan sifat hamburan cahaya diferensial sel untuk mengumpulkan data, tetapi FACS menggunakan antibodi yang sangat spesifik yang ditandai dengan pewarna fluoresen untuk membedakan antara tipe sel.
Metode Analisis
Flow cytometry menggunakan sensor untuk memperoleh data, tetapi FACS menggunakan elektromagnet untuk menyortir sampel.
Kata terakhir
Singkatnya, flow cytometry adalah teknik biologi sel analitik untuk menentukan karakteristik sel dalam campuran heterogen. Dengan demikian, ini membantu untuk menentukan jumlah sel, ukuran, dan kandungan asam nukleat sel, dll. Juga, menggunakan sifat hamburan cahaya diferensial sel yang unik untuk setiap jenis sel dalam campuran. Di sisi lain, FACS adalah jenis sitometri aliran yang memungkinkan pemilahan sel dalam campuran heterogen menjadi dua atau lebih jenis. Juga, ia menggunakan antibodi berlabel fluoresensi untuk secara khusus mengidentifikasi komponen dari berbagai jenis sel. Maka dari i
tu, FACS adalah teknik analisis pertama yang diikuti oleh flow cytometry dalam uji ekspre
si protein. Maka dari itu, Perbedaan yang menonjol antara flow cytometry dan FACS adalah metode diferensiasi dan fungsi sel.
Sumber bacaan:
- Robinson, Ryan, dan Stefan Pellenz. “Ryan Robinson dan Stefan Pellenz.” Antibodi, 6 Desember 2013, Tersedia Di Sini . 2. “Flow Cytometry (FCM) /FACS | Penyortiran Sel yang Diaktifkan Fluoresensi (FACS). Sino Biological, Sino Biological Inc., Tersedia Di Sino .
Sumber gambar:
- “Cytometer” Oleh Kierano – Karya sendiri ( CC BY 3.0 ) melalui Commons Wikimedia 2. “Penyortiran Sel Berbantuan Fluoresensi (FACS) B” Oleh SariSabban ( CC BY-SA 3.0 ) melalui Commons Wikimedia
