Cara Membedakan Bagaimana Enzim Pembatasan Digunakan dalam Sidik Jari DNA

Enzim restriksi adalah jenis endonuklease yang dapat digunakan untuk memotong DNA untai ganda pada daerah tertentu. Mereka memungkinkan peneliti untuk mendapatkan fragmen DNA yang diinginkan dari DNA genom. Dalam sidik jari DNA, enzim restriksi dapat digunakan untuk memotong DNA untuk mendapatkan pola pita STR.

adalah endonuklease yang memotong DNA untai ganda di tengah untai pada urutan tertentu. Mereka digunakan dalam berbagai studi genomik seperti teknologi DNA rekombinan , kloning molekuler, analisis restriksi fragmen polimorfisme (RFLP), pemetaan DNA, dll. Sidik jari DNA adalah teknik dalam bioteknologi yang digunakan untuk penentuan karakteristik DNA atau Profil DNA organisme tertentu. Profil DNA dihasilkan berdasarkan jenis unsur berulang yang dikenal sebagai pengulangan tandem pendek (STR). Selama sidik jari DNA, daerah STR dicerna dengan enzim restriksi untuk mendapatkan pola pita yang disebut profil DNA .

Topik bahasan kami tentang:

Apa Itu Enzim Restriksi – Pengertian, Ciri, Fungsi 2. Bagaimana Enzim Restriksi Digunakan dalam DNA Fingerprinting – Peran Enzim Restriksi dalam DNA Fingerprinting

Istilah Kunci: Sidik Jari DNA, Enzim Pembatasan, Situs Pengenalan Pembatasan, Pengulangan Tandem Pendek (STR)

Yang perlu anda ketahui tentang Enzim Restriksi?

Enzim restriksi adalah endonuklease yang membelah DNA untai ganda pada sekuens DNA spesifik yang dikenal sebagai situs pengenalan restriksi. Maka dari itu, mereka adalah jenis gunting biokimia. Enzim restriksi secara alami diproduksi oleh bakteri untuk pertahanan melawan bakteriofag. Enzim ini diisolasi dari bakteri dan digunakan untuk memotong DNA di laboratorium. Kemampuan enzim restriksi untuk memotong DNA pada lokasi yang tepat memungkinkan peneliti untuk mengisolasi fragmen DNA yang diinginkan dari DNA genom. Kerja dua enzim restriksi ditunjukkan pada Gambar 1 .

Gambar 1: Enzim Pembatasan

Bagaimana Enzim Pembatasan Digunakan dalam Sidik Jari DNA

Dalam sidik jari DNA, pola unsur berulang yang disebut short tandem repeats (STRs) menjadi sasaran analisis. STR ditemukan di daerah sentromer kromosom, dan mereka milik daerah non-coding genom. Maka dari itu, STR adalah sejenis DNA satelit . Jadi, urutan pendek nukleotida (2-6 pasangan basa) diulang beberapa kali dalam variabel STR. Karena individu memiliki jumlah STR yang berbeda pada lokus tertentu. Maka dari itu, profil DNA unik untuk individu tertentu. Dalam pengertian itu, sidik jari DNA dapat digunakan dalam identifikasi individu dalam pengujian paternitas serta dalam penyelidikan forensik. Teknik sidik jari DNA dikembangkan oleh Sir Alec Jeffreys pada tahun 1984. Prosedur sidik jari DNA dijelaskan di bawah ini.

DNA harus diisolasi dari sampel biologis tertentu seperti darah, air liur, air mani, dll.
Daerah STR diamplifikasi oleh PCR untuk mendapatkan DNA dalam jumlah besar.
DNA yang diperkuat dapat mengalami pencernaan dengan enzim restriksi.
Fragmen dapat dipisahkan dengan elektroforesis gel berdasarkan ukurannya.

Pola pita STR yang berbeda pada beberapa individu ditunjukkan pada Gambar 2.

Gambar 2: Pola STR

Umumnya, DNA manusia terdiri dari 700.000 situs pengenalan restriksi di seluruh genom. Maka dari itu, sejumlah besar situs pengenalan pembatasan juga dapat ditemukan di dalam wilayah STR. Dengan memotong STR oleh enzim restriksi pada situs pengenalan restriksi tertentu, pola pita dapat diperoleh. Karena jumlah pengulangan yang bervariasi di wilayah STR, pola pita juga berbeda per individu.

Kata terakhir

Sumber bacaan:

“Sidik Jari DNA.” Encyclopædia Britannica , Encyclopædia Britannica, Inc., 15 Februari 2016, Tersedia di sini .

Sumber gambar:

“TaiIMAe” Oleh Inks002 di Wikipedia bahasa Inggris (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia 2. “D1S80Demo” Oleh PaleWhaleGail di Wikipedia bahasa Inggris (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia