Tripsin adalah protease serin yang memotong residu lisin dan arginin pada terminal-C peptida . Ini adalah enzim yang paling banyak digunakan dalam kultur sel untuk melepaskan sel-sel yang melekat dari permukaan pembuluh kultur. Tripsin mudah ditoleransi oleh sebagian besar jenis sel yang ditanam dalam kultur. Aktivitasnya dapat dengan mudah dinetralkan dengan penambahan serum ke dalam media kultur. Kedua karakteristik tripsin ini memfasilitasi penggunaannya dalam kultur sel. Umumnya, tripsin ditambahkan ke kultur sel dengan EDTA. Peran tripsin dalam kultur sel dijelaskan dalam artikel ini.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa Itu Tripsin – Pengertian, Ciri, Fungsi 2. Bagaimana Tripsin Bekerja dalam Kultur Sel – Peran Tripsin dalam Kultur Sel
Istilah Kunci: Protein Perekat, Adhesi Sel, Enzim Pencernaan, Tripsin, Tripsinisasi
Yang perlu anda ketahui tentang Tripsin?
Tripsin adalah enzim pencernaan yang memecah protein dalam sistem pencernaan banyak vertebrata. Hal ini ditemukan dalam jus pankreas. Tripsin memotong residu lisin dan arginin dari terminal karboksi peptida. Namun, itu tidak membelah mereka ketika kedua asam amino ini diikuti oleh pralin. Aktivitas tripsin digunakan dalam banyak proses bioteknologi, dan aksi tripsin dikenal sebagai tripsinisasi atau proteolisis tripsin. Struktur kristal tripsin ditunjukkan pada Gambar 1 .
Gambar 1: Tripsin
PH optimal untuk aksi tripsin adalah 7,6-8,5. Umumnya, fenol merah digunakan dalam uji tripsin untuk memantau kisaran pH di atas. Fenol merah memberikan warna merah muda pada kisaran pH ini. Uji tripsin dilakukan di atas es kering.
Bagaimana Tripsin Bekerja dalam Kultur Sel
Protein pada membran plasma bertanggung jawab untuk berbagai fungsi yang penting untuk pemeliharaan aktivitas fisiologis normal sel. Beberapa protein membran plasma seperti keluarga cadherin adalah protein perekat yang berfungsi sebagai jangkar, menghubungkan protein sitoskeleton ke matriks ekstraseluler. Ini membantu dalam adhesi sel dan migrasi sel. Protein perekat di dalam membran plasma ditunjukkan pada Gambar 2 .
Gambar 2: Protein Perekat Sel
Dalam kultur sel, tripsin dapat ditambahkan ke media untuk melepaskan sel-sel yang melekat dari permukaan pembuluh kultur dengan mencerna protein perekat. Tripsin juga melepaskan sel dari agregat melalui pencernaan protein perekat. EDTA juga ditambahkan ke kultur sel bersama dengan tripsin untuk mengkelat ion divalen dalam medium. Ion kalsium dan magnesium dapat menghambat kerja tripsin. Pada akhirnya, tripsin membantu untuk mendapatkan sel individu dari kultur sel, memfasilitasi pemrosesan hilir sel.
Kata terakhir
Tripsin adalah enzim fotolitik yang mencerna peptida. Tripsin banyak digunakan dalam kultur sel untuk mendapatkan sel individu karena tripsin mencerna protein perekat dan melepaskan sel ke dalam medium.
Sumber bacaan:
- “Perubahan Proteom yang Diinduksi Tripsin selama Subkultur Sel di Sel Mamalia.” Jurnal Ilmu Biomedis , BioMed Central, 11 Mei 2010, Tersedia di sini .
Sumber gambar:
- “1UTN” Oleh pengguna: DrKjaergaard – Karya sendiri: Dari file PDB 1UTN. Dibuat dengan PyMol (Domain Publik) melalui Commons Wikimedia 2. “Adhesi Sel” Oleh ZabMilenko di Wikipedia bahasa Inggris – Ditransfer dari en.wikipedia ke Commons oleh Kekacauan yang Direncanakan menggunakan CommonsHelper (Domain Publik) melalui Commons Wikimedia
