Elektroforesis adalah teknik laboratorium yang dilakukan dengan tujuan memisahkan molekul menurut ukuran dan muatan listriknya sehingga diagnosis penyakit dapat dilakukan, ekspresi protein dapat diverifikasi atau mikroorganisme dapat diidentifikasi.
Elektroforesis adalah prosedur sederhana dan berbiaya rendah, yang digunakan dalam rutinitas laboratorium dan dalam proyek penelitian. Sesuai dengan tujuan elektroforesis, mungkin perlu dilakukan tes dan pemeriksaan lain agar diagnosis dapat dicapai, misalnya.
untuk apa ini
Elektroforesis dapat dilakukan untuk:
- Mengidentifikasi virus, jamur, bakteri dan parasit, aplikasi ini menjadi lebih umum dalam proyek penelitian;
- Tes paternitas;
- Periksa ekspresi protein;
- Identifikasi mutasi, berguna dalam diagnosis leukemia, misalnya;
- Menganalisis jenis hemoglobin yang bersirkulasi, berguna dalam diagnosis anemia sel sabit;
- Kaji jumlah protein yang ada dalam darah.
Elektroforesis dapat dilakukan untuk tujuan yang berbeda, baik dalam proyek penelitian maupun diagnosis, karena merupakan teknik yang sederhana dan murah.
Bergantung pada tujuan elektroforesis, mungkin perlu dilakukan tes pelengkap lainnya agar dokter dapat menyimpulkan diagnosisnya.
Bagaimana itu dibuat
Elektroforesis adalah teknik laboratorium dan, untuk dilakukan, perlu menyiapkan gel agarosa atau poliakrilamida, tergantung pada tujuan melakukan teknik tersebut, larutan buffer, tangki elektroforesis, penanda berat molekul dan zat yang memungkinkan visualisasi sampel saat terkena sinar UV atau LED. Setelah menyiapkan dan memadatkan gel, tekniknya dapat dilakukan sebagai berikut:
- Tempatkan setiap sampel dalam sumur gel , campurkan sedikit penanda berat molekul;
- Tempatkan di salah satu sumur kontrol positif , yaitu zat yang diketahui apa itu, dan di sumur lain, kontrol negatif, untuk menjamin validitas reaksi. Di kedua sumur, penanda berat molekul juga harus ada;
- Tempatkan gel dalam tangki elektroforesis , jika tidak, dengan larutan buffer khusus, dan hidupkan perangkat sehingga arus listrik yang dihasilkan mampu menghasilkan beda potensial dan memisahkan partikel sesuai dengan muatan dan ukurannya. Durasi lari elektroforesis bervariasi sesuai dengan tujuan prosedur, dan dapat bertahan hingga 1 jam;
- Visualisasikan hasil elektroforesis melalui transiluminator . Ketika gel ditempatkan di bawah sinar UV atau LED, pola pita dapat divisualisasikan: semakin besar molekul, semakin sedikit migrasi, semakin dekat ke sumur, sedangkan molekul lebih ringan, semakin besar potensi migrasi. .
Agar reaksi dapat divalidasi, pita kontrol positif perlu divisualisasikan dan tidak ada yang divisualisasikan dalam kontrol negatif, jika tidak, ini menunjukkan bahwa telah terjadi kontaminasi, dan seluruh proses harus diulang.
Jenis elektroforesis
Elektroforesis dapat dilakukan untuk berbagai tujuan dan, sesuai dengan tujuannya, berbagai jenis gel dapat digunakan, yang paling umum adalah poliakrilamida dan agarosa.
Elektroforesis untuk mengidentifikasi mikroorganisme lebih umum dilakukan di laboratorium penelitian, namun untuk tujuan diagnostik, elektroforesis dapat digunakan untuk mengidentifikasi penyakit hematologi dan penyakit yang berkembang dengan peningkatan jumlah protein, jenis utama elektroforesis adalah:
1. Elektroforesis hemoglobin
Elektroforesis hemoglobin adalah teknik laboratorium yang dilakukan untuk mengidentifikasi berbagai jenis hemoglobin yang beredar dalam darah, sehingga memungkinkan untuk mengidentifikasi adanya penyakit yang berkaitan dengan sintesis hemoglobin. Jenis hemoglobin diidentifikasi melalui elektroforesis pada pH tertentu, idealnya antara 8,0 dan 9,0, dan pola pita diverifikasi yang dapat dibandingkan dengan pola normal, memungkinkan untuk mengidentifikasi adanya hemoglobin abnormal.
Kegunaannya: Elektroforesis hemoglobin digunakan untuk menyelidiki dan mendiagnosis penyakit yang berkaitan dengan sintesis hemoglobin, seperti anemia sel sabit dan penyakit hemoglobin C, dan berguna dalam membedakan talasemia. Pelajari cara menafsirkan elektroforesis hemoglobin.
2. Elektroforesis protein
Elektroforesis protein adalah pemeriksaan yang diminta oleh dokter untuk menilai jumlah protein yang bersirkulasi dalam darah dan dengan demikian mengidentifikasi penyakit. Tes ini dilakukan dari sampel darah yang disentrifugasi untuk mendapatkan plasma, yaitu bagian darah yang terdiri dari protein, di antara zat lainnya.
Setelah elektroforesis, pola pita dapat divisualisasikan dan, kemudian, grafik yang menunjukkan jumlah setiap fraksi protein, menjadi dasar untuk diagnosis.
Kegunaannya: Elektroforesis protein memungkinkan dokter untuk menyelidiki terjadinya multiple myeloma, dehidrasi, sirosis, peradangan, penyakit hati, pankreatitis, lupus, dan hipertensi sesuai dengan pola pita dan grafik yang ditunjukkan pada laporan pengujian .
Memahami cara melakukannya dan memahami hasil elektroforesis protein.