Perbedaan yang menonjol antara membran nitroselulosa dan nilon adalah membran nitroselulosa memiliki afinitas tinggi untuk pengikatan protein sedangkan membran nilon memiliki afinitas tinggi untuk pengikatan asam nukleat . Selanjutnya, interaksi hidrofobik dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nitroselulosa sementara interaksi ionik, hidrofobik, dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nilon.
Membran nitroselulosa dan nilon adalah dua jenis membran tempat makromolekul dipindahkan dari gel. Namun, membran nitroselulosa dapat digunakan untuk mengikat DNA dan RNA juga.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa itu Membran Nitroselulosa – Definisi, Struktur, Mekanisme Pengikatan, Keuntungan 2. Apa itu Membran Nilon? – Definisi, Struktur, Mekanisme Pengikatan, Keuntungan 3. Apa Persamaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon – Garis Besar Karakteristik Umum 4. Apa Perbedaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon – Perbandingan Perbedaan Utama
Istilah Utama
Afinitas, Biodyne A, Biodyne B, Nitroselulosa, Asam Nukleat, Nilon, Ukuran Pori, Protein
Yang perlu anda ketahui tentang Membran Nitroselulosa?
Membran nitroselulosa adalah matriks umum yang digunakan dalam Western blotting karena afinitas pengikatan protein yang tinggi. Namun, ini dapat digunakan untuk mendeteksi asam nukleat selain dari protein dan glikoprotein yang tidak bergerak. Imobilisasi makromolekul terutama terjadi melalui interaksi hidrofobik. Ikatan hidrogen juga terbentuk antara gugus nitro pada membran dan rantai samping asam amino dari protein. Imobilisasi protein akan tinggi pada konsentrasi garam tinggi dan metanol rendah.
Gambar 1: Prinsip Blot
Membran nitroselulosa tersedia dalam 100% bentuk murni nitroselulosa dengan luas permukaan yang tinggi, yang seragam. Pra-ukuran yang tersedia adalah 0,2 m dan 0,45 m. Ukuran pori yang kecil lebih baik untuk pengikatan dengan protein kecil (<14 kDa). Kapasitas pengikatan dan retensi protein adalah 80-250 g/cm 2 . Membran pra-rakitan siap digunakan. Salah satu keuntungan utama membran nitroselulosa adalah latar belakangnya yang sangat rendah karena dapat dengan mudah diblokir. Membran nitroselulosa yang didukung dapat dilucuti dan dipasang kembali.
Yang perlu anda ketahui tentang Membran Nilon?
Membran nilon adalah matriks yang banyak digunakan untuk pengikatan asam nukleat. Membran nilon secara mekanis lebih kuat daripada membran nitroselulosa. Dua jenis utama membran nilon yang digunakan dalam blotting adalah Biodyne A dan Biodyne B. Ukuran pori dari kedua jenis tersebut adalah 0,45 m. Mereka tahan terhadap panas dan pelarut. Juga, mereka tidak akan menyusut, retak atau sobek. Keduanya memberikan latar belakang yang rendah dibandingkan membran nitroselulosa.
Gambar 2: Membran Southern Blot
- Biodyne A terbuat dari nilon 66 yang tidak dimodifikasi. Sensitivitas tinggi dan resolusi yang sangat baik adalah manfaat dari Biodyne A. Karena Biodyne A mengandung muatan positif dan negatif, ia dapat digunakan untuk mengikat banyak jenis makromolekul.
- Biodyne B terbuat dari nilon bermuatan positif 66. Maka dari itu, ia memiliki kapasitas pengikatan yang sangat baik untuk asam nukleat bermuatan negatif seperti DNA dan RNA.
Persamaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon
- Membran nitroselulosa dan Nilon adalah dua jenis membran yang digunakan untuk mentransfer makromolekul dari gel dalam teknik blotting.
- Mereka memungkinkan deteksi makromolekul pada membran.
- Kedua jenis membran dapat digunakan untuk mentransfer asam nukleat.
- Mereka dapat ditelanjangi dan ditiru.
Perbedaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon
Definisi
Membran nitroselulosa adalah istilah untuk membran lengket yang digunakan untuk melumpuhkan asam nukleat dan protein dalam blotting sedangkan membran nilon adalah istilah untuk jenis membran dengan kekuatan tinggi dan ketahanan panas yang digunakan untuk melumpuhkan makromolekul.
Terdiri dari
Membran nitroselulosa terdiri dari selulosa ternitrasi sedangkan membran nilon terdiri dari nilon Biodyne A dan Biodyne B yang tidak dimodifikasi atau bermuatan positif.
Ukuran Pori
Ukuran pori membran nitroselulosa adalah 0,2 m dan 0,45 m sedangkan ukuran pori membran nilon adalah 0,45 m.
Kekuatan
Membran nitroselulosa rapuh dan karenanya tidak dapat digunakan kembali sedangkan membran nilon secara mekanis kuat.
Metode Transfer
Transfer elektroforesis terutama digunakan dalam transfer protein ke membran nitroselulosa sementara transfer kapiler adalah praktik umum dengan membran nilon.
Afinitas
Membran nitroselulosa memiliki afinitas tinggi terhadap protein sedangkan membran nilon memiliki afinitas tinggi terhadap asam nukleat. Membran nitroselulosa juga dapat digunakan untuk asam nukleat.
Blotting
Membran nitroselulosa lebih baik untuk Western blotting sedangkan membran nilon lebih baik untuk Southern dan Northern Blotting .
Interaksi yang Mengikat
Interaksi hidrofobik dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nitroselulosa sementara interaksi ionik, hidrofobik, dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nilon.
Kapasitas Pengikatan Protein
Kapasitas ikat protein membran nitroselulosa adalah 80-250 g/cm 2 sedangkan kapasitas ikat protein membran nilon adalah 150-200 g/cm 2 .
Kata terakhir
Membran nitroselulosa adalah membran rapuh yang terutama digunakan untuk melumpuhkan protein di Western blotting sedangkan membran nilon adalah membran kuat yang terutama digunakan untuk melumpuhkan asam nukleat. Membran nitroselulosa mengikat molekul melalui interaksi hidrofobik sedangkan membran nilon mengikat molekul melalui interaksi elektrostatik. Maka dari itu, Perbedaan yang menonjol antara membran nitroselulosa dan nilon adalah afinitasnya.
Sumber bacaan:
- “Membran Nitroselulosa untuk Western Blotting | Thermo Fisher Scientific – LK.” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Tersedia Di Sini 2. “Biodyne A Nylon Membrane, 0.45 m, 8 Cm x 12 Cm.” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Tersedia Di Sini 3. “Biodyne B Nylon Membrane, 0.45 m, 8 Cm x 12 Cm.” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Tersedia Di Sini
Sumber gambar:
- “Blot biologi” Oleh Gbdivers – Karya sendiri ( CC BY-SA 3.0 ) melalui Commons Wikimedia 2. “Selatan blot membran” Oleh Bojan unar – Karya sendiri ( CC BY-SA 4.0 ) melalui Commons Wikimedia
