Perbedaan yang menonjol antara tripsinisasi hangat dan dingin adalah tripsinisasi hangat terlibat dalam inkubasi jaringan dengan tripsin hangat pada 36,50 °C sedangkan tripsinisasi dingin terlibat dalam perendaman jaringan dalam tripsin dingin pada 4 °C diikuti oleh inkubasi pada 36,50 ° C. _ Selanjutnya, kerusakan sel tinggi pada tripsinisasi hangat sementara tripsinisasi dingin meminimalkan efek jangka panjang tripsin hangat pada jaringan.
Tripsinisasi hangat dan dingin adalah dua teknik tripsinisasi, metode disagregasi enzimatik jaringan yang digunakan dalam kultur sel primer . Di sini, tripsin adalah enzim proteolitik yang memecah protein yang bertanggung jawab untuk melekatkan sel dalam kultur.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa itu Tripsinisasi Hangat – Pengertian, Metode, Kegunaan 2. Apa itu Tripsinisasi Dingin – Pengertian, Metode, Kepentingan 3. Apa Persamaan Antara Tripsinisasi Hangat dan Dingin – Garis Besar Karakteristik Umum 4. Apa Perbedaan Antara Hangat dan Dingin Tripsinisasi – Perbandingan Perbedaan Kunci
Istilah Utama
Protein Perekat, Tripsinisasi Dingin, Disagregasi Enzimatik, Kultur Sel Primer, Tripsin, Tripsinisasi Hangat
Yang perlu anda ketahui tentang Tripsinisasi Hangat?
Tripsinisasi hangat adalah salah satu dari dua jenis metode tripsinisasi yang digunakan dalam disagregasi enzimatik jaringan sambil mempersiapkannya untuk kultur sel primer. Ini langsung menggunakan tripsin hangat pada 36,50 ° C untuk disagregasi. Pertama-tama, jaringan cincang dicuci dengan DBSS (diseksi larutan garam basal) dan kemudian ditambahkan ke labu dengan tripsin hangat. Sel-sel yang dipisahkan berada di supernatan dan pada setiap interval 30 menit, isi labu diaduk untuk memulihkan sel-sel yang dipisahkan. Kemudian, tripsin segar ditambahkan ke dalam campuran. Dan, prosedur ini dapat dilanjutkan selama 3-4 jam sambil memulihkan sel-sel yang terdisosiasi. Akhirnya, tripsin dapat dihilangkan dari campuran dengan sentrifugasi.
Gambar 1: Tripsinisasi Hangat
Selanjutnya, tripsinisasi hangat adalah metode panen sel yang paling efektif karena menggunakan tripsin hangat secara langsung. Juga, prosedur ini dapat diselesaikan dalam beberapa jam. Namun, hasil sel yang layak kurang karena efek buruk dari tripsin hangat.
Yang perlu anda ketahui tentang Tripsinisasi Dingin?
Tripsinisasi dingin adalah metode tripsinisasi kedua. Ini kurang efektif tetapi menghasilkan sejumlah besar sel yang layak. Salah satu kelemahan dari trypsinization dingin adalah waktu yang dibutuhkan untuk penyelesaian prosedur. Umumnya, jaringan yang disiapkan terlebih dahulu direndam dengan tripsin dingin pada suhu 4 °C selama sekitar 6-24 jam. Kemudian, jaringan yang pulih diinkubasi dengan sisa tripsin pada suhu 36,50 °C selama 20-30 menit. Pemipetan berulang membantu membubarkan sel-sel yang terpisah.
Gambar 2: Tripsinisasi Dingin
Namun, seperti yang disebutkan sebelumnya, risiko sel yang rusak karena paparan tripsin hangat dalam waktu lama adalah minimal dalam metode ini. Maka dari itu, metode ini menunjukkan peningkatan viabilitas sel dalam kultur. Juga, karena kekosongan sentrifugasi, metode ini cocok untuk laboratorium konvensional. Namun demikian, kelemahan utama dari metode ini adalah tidak dapat digunakan untuk sejumlah besar jaringan sekaligus.
Persamaan Antara Tripsinisasi Hangat dan Dingin
- Tripsinisasi hangat dan dingin adalah dua teknik tripsinisasi, yang menggunakan tripsin untuk disagregasi enzimatik dari protein perlekatan dalam kultur sel.
- Kedua metode dapat digunakan saat mempersiapkan jaringan untuk kultur sel primer.
- Selanjutnya, kedua metode menggunakan tripsin hangat pada 36,50 °C di beberapa titik.
- Selain itu, mereka membantu mengisolasi sel.
Perbedaan Antara Tripsinisasi Hangat dan Dingin
Definisi
Tripsinisasi hangat adalah istilah untuk salah satu dari dua metode tripsinisasi yang terlibat dalam inkubasi jaringan dengan tripsin pada 36,50 °C diikuti dengan penghilangan tripsin dengan sentrifugasi sedangkan tripsinisasi dingin adalah istilah untuk metode tripsinisasi lain yang terlibat dalam perendaman dengan tripsin pada 4 °C diikuti dengan inkubasi dengan tripsin pada 36,50 °C. Jadi, ini adalah Perbedaan yang menonjol antara tripsinisasi hangat dan dingin.
Penggunaan Tripsin Hangat (36,50 °C)
Satu perbedaan utama lainnya antara tripsinisasi hangat dan dingin adalah jaringan diperlakukan dengan tripsin hangat selama 3-4 jam dalam tripsinisasi hangat sementara jaringan diinkubasi dengan tripsin hangat selama 20-30 menit.
Sentrifugasi
Sentrifugasi adalah perbedaan lain antara tripsinisasi hangat dan dingin. Sentrifugasi sangat penting dalam trypsinization hangat untuk menghilangkan trypsin dari sampel sementara sentrifugasi tidak diperlukan dalam trypsinization dingin.
Efektivitas
Juga, tripsinisasi hangat lebih efektif sedangkan tripsinisasi dingin kurang efektif.
Pentingnya
Selain itu, signifikansi mereka adalah perbedaan lain antara tripsinisasi hangat dan dingin. Tripsinisasi hangat dapat menyebabkan kerusakan pada sel-sel di jaringan sementara efek buruk dari tripsinisasi hangat telah dihilangkan dalam tripsinisasi dingin.
Hasil Sel yang Layak
Hasil sel yang layak adalah perbedaan lain antara trypsinization hangat dan dingin. Tripsinisasi hangat menghasilkan lebih sedikit jumlah sel yang layak sementara hasil sel yang layak tinggi dalam tripsinisasi dingin.
Waktu
Selanjutnya, trypsinization hangat membutuhkan lebih sedikit waktu untuk menyelesaikan prosedur sementara trypsinization dingin membutuhkan lebih banyak waktu.
Aplikasi
Selain itu, trypsinization hangat digunakan untuk jaringan yang mengandung matriks ekstraseluler dan jaringan ikat fibrosa sedangkan trypsinization dingin digunakan untuk jaringan lunak seperti organ embrionik.
Kata terakhir
Tripsinisasi hangat adalah metode tripsinisasi, yang menggunakan tripsin hangat pada suhu 36,50 °C untuk merawat jaringan guna mendegradasi protein perlekatan. Meskipun ini merupakan metode disagregasi enzimatik jaringan yang efektif, metode ini menghasilkan jumlah sel yang lebih sedikit karena efek merugikan dari tripsin hangat. Sebagai perbandingan, tripsinisasi dingin adalah metode tripsinisasi kedua, yang melibatkan perendaman jaringan dengan tripsin dingin pada suhu 4 °C sebelum inkubasi dengan tripsin hangat. Metode ini kurang efektif, tetapi menghasilkan sejumlah besar sel yang layak. Maka dari itu, Perbedaan yang menonjol antara tripsinisasi hangat dan dingin adalah penggunaan tripsin hangat dan pentingnya masing-masing metode.
Sumber bacaan:
- “Tripsinisasi.” Scribd , Scribd, Tersedia Di Sini .
