Reagen Benedict adalah larutan tembaga biru yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan gula pereduksi: aldehida, keton alpha-hydroxy dan hemiketal. Ini dikembangkan oleh Stanley R. Benedict (1884-1936).
Keton alfa-hidroksi dicirikan dengan memiliki gugus hidroksil di sekitar keton. Sementara itu, hemiketal adalah senyawa yang dihasilkan dari penambahan alkohol ke aldehida atau keton. Reagen Benedict bereaksi tanpa pandang bulu dengan semua gula pereduksi ini.
Pewarnaan tabung reaksi setelah menambahkan reagen Benedict memungkinkan kita untuk mengetahui secara semi-kuantitatif berapa banyak gula pereduksi yang terlarut. Sumber: Thebiologyprimer [CC0]
Metode Benedict didasarkan pada aksi reduksi gula pada Cu 2+ , yang berwarna biru, yang mengubahnya menjadi Cu + . Cu + membentuk endapan merah bata dari oksida tembaga. Namun, tergantung pada konsentrasi gula, spektrum warna akan muncul (gambar atas).
Perhatikan bahwa jika reagen Benedict ditambahkan ke dalam tabung reaksi tanpa gula pereduksi (0%), ia tidak mengalami perubahan warna kebiruan. Jadi, ketika konsentrasi lebih besar dari 4%, tabung reaksi diwarnai coklat.
Sejarah
Reagen dibuat oleh ahli kimia Amerika Stanley Rossiter Benedict pada tahun 1909, yang menerbitkan artikel ilmiahnya A reagen untuk deteksi gula pereduksi , dalam jurnal J. Biol.Chem.
Selanjutnya, Lewis dan Benedict (1915) menerbitkan metode untuk penentuan gula pereduksi dalam darah, dengan menggunakan pikrat sebagai indikator; tetapi dihentikan karena kurangnya kekhususan.
Reagen Benedict sangat mirip dengan Fehling. Mereka berbeda karena Benediktus menggunakan ion sitrat dan garam natrium karbonat; sedangkan Fehling menggunakan ion tartrat dan natrium hidroksida.
Uji Benedict bersifat kualitatif, yaitu hanya mendeteksi adanya gula pereduksi. Namun, pereaksi Benedict dapat menjadi kuantitatif jika mengandung kalium tiosianat dalam larutan, yang membentuk endapan putih tembaga tiosianat yang dapat dititrasi menggunakan standar glukosa.
Untuk apa reagen benedict?
Deteksi glukosa dalam urin
Reagen Benedict masih digunakan untuk mendeteksi adanya glukosa dalam urin dan merupakan indikasi penyakit diabetes pada pasien yang urinnya dilakukan uji Benedict. Meskipun, tidak dapat disangkal bahwa glukosuria memiliki asal yang berbeda.
Misalnya, peningkatan glikosuria ditemukan dalam kondisi seperti: kehamilan, glikosuria ginjal primer, asidosis tubulus ginjal, sindrom Fanconi primer atau sekunder, hiperaldosteronisme, dan pankreatitis akut atau kanker pankreas.
Reagen Benedict berwarna biru karena adanya Cu 2+ , yang direduksi menjadi Cu + oleh aksi gula pereduksi; dalam hal ini, glukosa, membentuk endapan tembaga (I) oksida berwarna merah bata.
Pewarnaan larutan
Warna dan pembentukan endapan dalam uji Benedict yang diterapkan pada urin bervariasi tergantung pada konsentrasi gula pereduksi. Jika konsentrasi glukosa dalam urin kurang dari 500 mg/dL, larutan berubah menjadi hijau dan tidak terbentuk endapan.
Konsentrasi glukosa urin 500 – 1.000 mg / dL menyebabkan endapan hijau pada uji Benedict. Pada konsentrasi lebih besar dari 1.000 sampai 1.500 mg/dL menyebabkan terbentuknya endapan kuning.
Jika konsentrasi glukosa 1.500 – 2.000 mg/dL, akan terlihat endapan jingga. Terakhir, konsentrasi glukosa dalam urin lebih besar dari 2.000 mg/dL, akan menyebabkan terbentuknya endapan berwarna merah bata.
Hal ini menunjukkan bahwa uji Benedict bersifat semi-kuantitatif dan hasilnya dilaporkan menggunakan persilangan. Jadi, misalnya, tanda silang (+) sesuai dengan pembentukan endapan hijau; dan pembentukan endapan merah bata, sesuai dengan empat persilangan (++++).
Deteksi berbagai monosakarida dan disakarida
Reagen Benedict mendeteksi adanya gula pereduksi yang memiliki gugus fungsi bebas atau gugus fungsi keton bebas, sebagai bagian dari struktur molekulnya. Ini adalah kasus glukosa, galaktosa, manosa dan fruktosa (monosakarida), serta laktosa dan maltosa (disakarida).
Sukrosa dan pati tidak bereaksi dengan pereaksi Benedict karena memiliki gugus pereduksi bebas. Selain itu, ada senyawa yang mengganggu tes Benedict dalam urin, memberikan hasil positif palsu; seperti kasus salisilat, penisilin, streptomisin, levodopa, asam nalidiksat dan isoniazid.
Ada bahan kimia yang ada dalam urin yang dapat mengurangi reaksi Benedict; misalnya: kreatinin, urat, dan asam askorbat.
Komponen
Komponen reagen Benedict adalah sebagai berikut: tembaga sulfat pentahidrat, natrium karbonat, trinatrium sitrat, dan air suling.
Tembaga sulfat pentahidrat, CuSO 4 ยท 5H 2 O, mengandung Cu 2+ : senyawa yang memberikan warna biru pada reagen Benedict. Gula pereduksi bekerja pada Cu 2+ , menyebabkan reduksi menjadi Cu + dan pembentukan endapan merah bata dari oksida tembaga (Cu 2 O).
Natrium karbonat menghasilkan media alkali, yang diperlukan untuk reduksi tembaga berlangsung. Bereaksi natrium karbonat dengan air, menghasilkan natrium bikarbonat dan ion hidroksil, OH – , bertanggung jawab untuk alkalinitas media yang diperlukan untuk proses reduktif terjadi.
Natrium sitrat membentuk kompleks dengan tembaga (II) yang mencegahnya mengalami reduksi menjadi Cu (I) selama penyimpanan.
Prosedur penggunaan
5 mL reagen Benedict dimasukkan ke dalam tabung reaksi berukuran 20 x 160 mm dan ditambahkan 8 tetes urin. Tabung reaksi dikocok perlahan dan ditempatkan dalam wadah berisi air mendidih selama 5-10 menit.
Setelah waktu ini, tabung dikeluarkan dari penangas air panas dan permukaannya didinginkan dengan air mengalir untuk akhirnya mendapatkan pembacaan hasil yang diperoleh saat melakukan uji Benedict (warna).
Reaksi uji Benedict
Reduksi Cu(II) selama uji Benedict dapat diuraikan sebagai berikut:
RCHO + 2 Cu 2+ (dalam kompleks) + 5 OH – => RCOO – + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehida; RCOO – = (ion karboksilat); Cu 2 O = tembaga oksida, endapan merah bata.
Pembuatan reagen Benedict
173 gram natrium sitrat dan 100 gram natrium karbonat ditimbang dan dilarutkan bersama dalam 800 mL air suling hangat. Jika jejak zat yang tidak larut diamati, larutan harus disaring.
Di sisi lain, 17,3 gram tembaga sulfat pentahidrat dilarutkan dalam 100 mL air suling.
Selanjutnya, kedua larutan berair dicampur perlahan dan pengadukan terus menerus dilanjutkan, hingga 1.000 mL dengan air suling.
Referensi
- Graham Solomons TW, Craig B. Fryhle. (2011). Kimia Organik . amina. ( edisi ke- 10 .). Wiley Plus.
- Clark J. (2015). Oksidasi aldehida dan keton. Dipulihkan dari: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). reagen Benedict. Dipulihkan dari: en.wikipedia.org
- Tim redaksi. (9 Januari 2019). Uji Benedict: Prinsip, Persiapan Reagen, Prosedur dan Interpretasi. Dipulihkan dari: Laboratoryinfo.com
- Dr Whitson. (sf). Reagen Benedict: Tes untuk Gula Pereduksi. Dipulihkan dari: nku.edu