Perbedaan yang menonjol antara imunopresipitasi dan western blot adalah imunopresipitasi mengisolasi protein target dari larutan menggunakan antibodi dan manik-manik agarosa sedangkan western blot menggunakan elektroforesis gel dan probe antibodi untuk menganalisis protein.
Imunopresipitasi dan western blot adalah dua teknik analisis protein. Sementara imunopresipitasi menggunakan radiolabeling, western blot menggunakan antibodi untuk visualisasi protein yang terpisah.
Topik bahasan kami tentang:
- Apa itu Imunopresipitasi?
- Definisi, Teknik, Karakteristik
- Apa itu Western Blot?
- Definisi, Teknik, Karakteristik
- Persamaan Antara Imunopresipitasi dan Western Blot
- Garis Besar Karakteristik Umum
- Perbedaan Antara Imunopresipitasi dan Western Blot
- Perbandingan dengan Perbedaan Kunci
Istilah Utama
Imunopresipitasi, Analisis Protein, Western Blot
Yang perlu anda ketahui tentang Imunopresipitasi?
Imunopresipitasi adalah teknik pengendapan protein dari larutan menggunakan pengikatan spesifik antibodi ke protein target. Di antara ribuan protein, penting untuk mengisolasi dan memusatkan protein dari larutan. Selain itu, antibodinya digabungkan ke substrat padat. Namun, teknik ini penting dalam imunopresipitasi protein individu, imunopresipitasi kompleks protein, imunopresipitasi kromatin, imunopresipitasi ribonukleoprotein, dan protein tag.
Gambar 1: Imunopresipitasi Kromatin
Selanjutnya, tiga metode imunopresipitasi meliputi langsung, tidak langsung, dan seleksi. Metode imunopresipitasi langsung menggunakan antibodi khusus untuk protein target untuk melumpuhkannya pada permukaan padat. Metode imunopresipitasi tidak langsung menggunakan antibodi khusus untuk sekelompok protein untuk imobilisasi. Selain itu, metode pemilihan penting ketika konsentrasi protein target rendah dalam suatu larutan.
Yang perlu anda ketahui tentang Western Blot?
Western blot atau imunoblot adalah teknik mendeteksi protein dalam suatu larutan berdasarkan ukuran dan spesifisitasnya. Metode ini menggunakan tiga tugas untuk memisahkan protein: pemisahan berdasarkan ukuran, transfer protein ke penyangga padat, serta penandaan protein target menggunakan antibodi primer dan sekunder untuk divisualisasikan.
Gambar 2: Western Blot
Pertama, antibodi primer berikatan dengan protein target. Kemudian, antibodi sekunder mengikat antibodi primer. Selanjutnya adalah pengikatan antibodi sekunder. Akhirnya, deteksi dilakukan dengan pewarnaan, imunofluoresensi, atau radioaktivitas. Namun, protein dalam larutan difraksinasi berdasarkan ukuran dengan elektroforesis gel sebelum deteksi dan pengikatan spesifik antibodi.
Persamaan Antara Imunopresipitasi dan Western Blot
- Imunopresipitasi dan western blot adalah dua teknik mengisolasi protein dari larutan.
- Selain itu, keduanya menggunakan antibodi spesifik untuk menargetkan protein dalam prosesnya.
Perbedaan Antara Imunopresipitasi dan Western Blot
Definisi
Imunopresipitasi adalah istilah untuk teknik pengendapan antigen protein dari larutan menggunakan antibodi yang secara khusus mengikat protein tertentu sedangkan western blot adalah istilah untuk teknik analitik yang banyak digunakan dalam biologi molekuler dan imunogenetik untuk mendeteksi protein spesifik dalam sampel jaringan homogenat atau ekstrak .
Pentingnya
Biasanya, imunopresipitasi mengisolasi protein target dari larutan menggunakan antibodi dan manik-manik agarosa, sedangkan western blot menggunakan elektroforesis gel dan probe antibodi untuk menganalisis ukuran dan jumlah protein.
Konformasi Protein
Imunopresipitasi bekerja pada konformasi asli protein sementara western blot menganalisis tahap denaturasi protein.
Konsentrasi
Selain itu, imunopresipitasi membutuhkan konsentrasi protein yang lebih tinggi sementara western blotting berlaku untuk konsentrasi protein yang lebih sedikit dalam larutan.
Identifikasi
Namun, imunopresipitasi menggunakan radiolabeling sedangkan western blot menggunakan antibodi yang terkonjugasi dengan enzim.
Kata terakhir
Singkatnya, imunopresipitasi dan western blot adalah dua teknik mengisolasi protein dari larutan. Pada imunopresipitasi, protein target diendapkan dari larutan, sedangkan pada western blot, protein larutan difraksinasi berdasarkan ukuran. Namun, metode deteksi keduanya sebagian besar sama dengan menggunakan antibodi. Maka dari itu, Perbedaan yang menonjol antara imunopresipitasi dan western blot adalah fungsinya.
Sumber bacaan:
- Yayasan Wikimedia. (2022, 15 Maret). Imunopresipitasi . Wikipedia, ensiklopedia gratis. Diakses tanggal 5 Agustus
- Yayasan Wikimedia. (2022, 21 Mei). noda Barat . Wikipedia, ensiklopedia gratis. Diakses tanggal 5 Agustus
Sumber gambar:
- “ Pengurutan imunopresipitasi kromatin” oleh Jkwchui- Own Work ( CC BY-SA 3.0 ) melalui Commons Wikimedia Commons
- ” Western Blot binding ” Bensaccoun-Own Work ( CC BY 3.0 ) melalui Commons Wikimedia Commons
